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1. 称样
称取固体试样0.20~1.00g或半固体试样1.00~2.00g或吸取2.00~10.00ml液体试样（全量法约相当氮5~25mg，微量法约相当氮30~200mg）。
2. 消化
将样品移入干燥的250ml或500ml消化管,加0.2g硫酸铜与6g 硫酸钾及12ml硫酸，摇匀后置于消化炉上，瓶口放一小漏斗或装上毒气罩接抽气泵或尾气吸收装置后加热，半固体、液体或含脂肪量较高的样品初加热时须小心控制，待内容物全部炭化，泡沫完全停止后，加强火力。全程约需定时40~60分钟。消化液呈蓝绿色澄清透明状后加热5~10分钟。待消化管放凉后，用洗瓶冲洗管口，约用水20ml。
3.蒸馏
蒸馏装置在每次开机后，打开冷凝水，设置好条件后空蒸一个样品以清洗管路，全自动定氮仪要选择好标准溶液的浓度，一般为硫酸标准滴定溶液c( 1/2H2SO4)=0.1000mol/L或盐酸标准滴定溶液c(HCl)=0.1000mol/L,标准溶液浓度也可根据氮含量作适当调整。
1)全量法：将消化好的试样装上蒸馏装置的托架，拉下保护罩， K06样品编号、 样品量与试剂添加量设定好后（一般硼酸30~50ml,氢氧化钠70~100ml）按运行键即可，在样品滴定完成后鸣音提示，计算结果显示于LCD屏幕上或通过RS232串口连接电脑直接打印正式的检验报告。K05与K02将硼酸与指示剂加于三角瓶中，K05设置好加碱量与蒸馏时间，在蒸馏完成后鸣音提示；K02按照预热-加碱-蒸馏的顺序，依次操作，碱量看后壁上的标尺添加；蒸馏完成后再空蒸一分钟，冲洗并移开三角瓶，开始滴定，记录下酸标准溶液消耗体积。
2)微量法：将消化好的样品移入100ml或250ml容量瓶中，并用少量水清洗消化管，洗液并入容量瓶中，再加水至刻度，混匀备用。准确吸取10.00~25.00ml试样处理液于干净的消化管中，余下步骤与全量法相同。
4.结果计算
X-------试样中蛋白质的含量，单位为克每百克或克每百毫升(g/100g或g/100ml)
V1------试样消耗硫酸或盐酸标准滴定液的体积，单位为毫升(ml)
V0------试剂空白消耗硫酸或盐酸标准滴定液的体积，单位为毫升(ml)
c------硫酸或盐酸标准滴定液浓度，单位为摩尔每升（mol/L）
0.01401------1.0ml硫酸[c(1/2H2SO4)=1.000mol/L]或盐酸[c(HCl) =1.000mol/L]标准滴定溶液相当的氮的质量，单位为克（g）
m------试样的质量或体积，单位为克或毫升（g或ml）
V2------吸取试样处理液的体积，单位为毫升（ml）
V3------样品消化液定容体积，单位为毫升（ml）
F------氮换算为蛋白质的系数。一般食物为6.25；乳制品为6.38；面粉为5.70；玉米、高粱为6.24；花生为5.46；米为5.95；大豆及其制品为6.25；肉与肉制品为6.25；大麦、小米、燕麦、裸麦为5.83；芝麻、向日葵为5.30。
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